Test di utilità clinica secondaria

Post Coital Test

• Consente studiare le proprietà del muco cervicale nel periodo ovulatorio e apprezzare la mobilità degli spermatozoi all’interno del muco stesso.
• La raccolta del muco è indolore, priva di rischi e non necessita ricovero ospedaliero
• La raccolta va eseguita a distanza di 6-12 ore dal rapporto sessuale
• Consiste nell’aspirazione del muco endocervicale che viene esaminato al microscopio per verificare:
  • Abbondanza,
  • Viscosità,
  • Trasparenza
  • Ph
  • Modo di cristalizzazione
  • La presenza di spermatozoi mobili annotando il tipo di mobilità.

Interpretazione

• • Test positivo – muco abbondante, filante, buona cristalizzazione (a foglia di falce che indica buona estrogenizzazione), PH compreso tra 6.5 – 8.5, presenza nel campo visivo di almeno 5 spermatozoi con motilità progressiva rettilinea veloce
  • Test negativo con buona qualità del muco – presenza nel campo visivo di pochi spermatozoi con scarsa motilità (motilità in situ con movimento oscillante) oppure immobili.
  • Test negativo con scarsa qualità del muco – muco poco abbondante, PH acido, opaco, scarsa cristalizzazione, pochi spermatozoi mobili.

Utilità

• Un PCT negativo indica il fattore cervicale di infertilità
• In tal caso è indicato indagare sulla presenza di anticorpi anti- spermatozoo
• Nonostante sia stato utilizzato per decenni PCT non è mai stato standardizzato, pertanto la sua interpretazione è operatore dipendente
• Diversi studi hanno dimostrato che la predittività del test sia bassa
• Uno studio randomizzato ha dimostrato che l’utilizzo del test conduca all’esecuzione di altri test e trattamenti aspecifici che non incrementano la possibilità di gravidanza bensì comportano una perdita di tempo prezioso alla coppia.
• La Società Americana di Riproduzione Assistita (ASRM) è del parere che l’esecuzione di PCT abbia poco razionale clinico.

Don’t perform a postcoital test (PCT) for the evaluation of infertility, ASRM, 2013.

Temperatura basale

• La temperatura basale  TB è la temperatura corporea che si registra in condizioni basali, cioè al momento del risveglio, prima di iniziare qualunque attività.
• L’importanza di tale misurazione si basa sul fatto che essa varia a seconda della fase del ciclo mestruale in relazione alla variazione della concentrazione sierica del progesterone.
• TB subisce un incremento pari a 0.1-03 °C durante la fase luteinica in seguito all’incremento del progesterone circolante
• In un ciclo ovulatorio la temperatura assumerà un andamento cosiddetto “bifasico” – bassa nella fase follicolare, seguita da un incremento dopo 2 giorni dal picco di LH e persistente per tutta la fase luteinica.

Vantaggi

• TB è una metodica semplice e poco costosa per la diagnosi di ovulazione

Svantaggi

• TB non predice il periodo fertile, in quanto l’ovulazione si verifica prima dell’incremento della temperatura
• Ha un utilizzo retrospettivo per dimostrare  l’avvenuta ovulazione
• Spesso è di difficile interpretazione
• Alcune donne ovulano presentando una TB monofasica
• TB non è indicatore sensibile della funzione del corpo luteo  cioè NON è in grado di diagnosticare l’insufficienza del corpo luteo

Evaluation of female infertility, Wendy Kuohung, MD, Mark D Hornstein, MD
Up to date, 2019

Biopsia endometriale e valutazione della fase luteale

• L’ovulazione implica la produzione di progesterone con trasformazione secretiva dell’endometrio e la biopsia endometriale lo può dimostrare
• Il test va eseguito nella fase medio-luteale del ciclo mestruale
• Questa tipologia di esame è stata a lungo considerata «gold standard» nella valutazione della funzione luteale e la diagnosi di insufficienza del corpo luteo.
• Studi più approfonditi hanno dimostrato che la biopsia endometriale per valutare l’inadeguatezza della funzione luteale non sia un metodo diagnostico valido per la mancanza di precisione e accuratezza e soprattutto non può distinguere le donne fertili da quelle infertili
• Perciò la biopsia endometriale non è più indicata per la valutazione della funzione ovulatoria o luteale nelle pazienti infertili e dovrebbe essere limitata solo ai casi di patologia endometriale sospetta (es. neoplasie, endometrite cronica)

Don’t perform endometrial biopsy in the routine evaluation of infertility. ASRM, 2015

Biopsia endometriale e recettività endometriale

• Endometrial Receptivity Array – ERA Test è una nuova procedura diagnostica che aiuta a determinare se la cavità endometriale è pronta all’impianto embrionario
• Consiste nel prelevare un campione di endometrio per l’analisi molecolare di 236 geni correlati allo stato di recettività endometriale
• Il test svela ulteriori informazioni sulla «finestra di impianto» – periodo di maggior recettività endometriale durante il ciclo mestruale della donna e che ha durata di 4-5 gg
• ERA test – NON è un esame di routine nell’iter diagnostico di infertilità femminile
• È indicato nelle pazienti con ripetuti fallimenti di impianto embrionario (RIF) oppure nei casi di poliabortività

ERA Test

• • È una procedura ambulatoriale, non richiede anestesia
  • Può essere eseguito in cicli naturali o di terapia ormonale sostitutiva, secondo il tipo di ciclo in cui verrà eseguito successivamente il trasferimento embrionario
  • Consiste nel prelevare un campione di endometrio dal fondo uterino utilizzando un catetere Pipelle
  • La biopsia va eseguita quando si pensa che si verifichi la finestra di impianto e dovrebbe corrispondere al giorno del presunto trasferimento embrionario

Interpretazione

• Ricettivo: Il profilo di espressione genica coincide con quello di un endometrio ricettivo normale.
• Pre-ricettivo: Il profilo di espressione genica coincide con quello di un endometrio in fase pre-ricettiva. Può essere dovuto allo spostamento della finestra di impianto e, per confermarlo, occorre analizzare una seconda biopsia nel giorno raccomandato.
• Post-ricettivo: Il profilo di espressione genica coincide con quello di un endometrio in fase post-ricettiva. Può essere dovuto allo spostamento della finestra di impianto e, per confermarlo, occorre analizzare una seconda biopsia nel giorno raccomandato.

La diagnosi di ricettività è valida per il tipo di ciclo in cui si è eseguito il test e pertanto l’embrione deve essere trasferito nello stesso tipo di ciclo e nella finestra di impianto personalizzata entro cui è stata ottenuta una diagnosi “ricettiva”.

Endometriocoltura

La cavita’ uterina non e’ sterile:

• In condizioni normali la specie colonizzante più presente è il Lactobacillus (>90%) che agisce come probiotico, in grado di inibire la crescita di batteri, virus e funghi
• La presenza di batteri patogeni (es. Stafilococco, Streptococco, Enterococco, Ureaplasma, Mycoplasma, Escherichia, Klebsiella, Neisseria e Chlamydia) può essere causa di infezioni, fallimento di impianto embrionario o aborto.
• Il più importante esempio di patologia causata dall’infezione della mucosa endometriale da parte dei germi patogeni è l’Endometrite Cronica (CE)
• CE è spesso asintomatica
• Attualmente la diagnosi si basa su istologia, isteroscopia e/0 coltura microbica
• L’endometriocoltura è l’attuale metodo «gold standard» per la valutazione delle infezioni batteriche MA
• E’ stato dimostrato che il 20-60 % dei batteri non possono essere coltivati
• La microbiologia molecolare cioè la valutazione dei genomi dei microorganismi (microbioma endometriale) consente la rilevazione dei batteri coltivabili e non coltivabili

Screening del microbioma endometriale – Endometriome

• Endometriome – test di screening eseguito mediante la tecnologia di sequenziamento del DNA (NGS) su campione di tessuto endometriale
• Permette di identificare la presenza di più di 10 batteri patogeni responsabili di endometrite cronica
• Permette di valutare la percentuale di Lactobacillus nel microbiota endometriale
• Nel caso in cui il test suggerisca una disbiosi o presenza di patogeni è possibile proporre un trattamento correttivo o una cura antibiotica appropriata

Indicazioni